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人细胞角蛋白20(CK20)试剂盒操作步骤

更新时间:2022-04-23      点击次数:608

人细胞角蛋白20(CK20)试剂盒操作步骤:


1. 标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。


32ng/mL

5号标准品

150μl的原倍标准品加入150μl标准品稀释液

16ng/mL

4号标准品

150μl的5号标准品加入150μl标准品稀释液

8ng/mL

3号标准品

150μl的4号标准品加入150μl标准品稀释液

4ng/mL

2号标准品

150μl的3号标准品加入150μl标准品稀释液

2ng/mL

1号标准品

150μl的2号标准品加入150μl标准品稀释液



2. 加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl,待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品最终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。


3. 温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。


4. 配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用


5. 洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。


6. 加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。


7. 温育:操作同3。


8. 洗涤:操作同5。


9. 显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色10分钟.


10. 终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。


11. 测定:以空白孔调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。


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