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土壤有效硼试剂盒说明书

发布时间:2023/10/11      点击次数:521

土壤有效硼试剂盒说明书

  微量法100T/96S

 

   :正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。

测定意义:

土壤中有效硼直接影响着植物的吸收和利用。

 

测定原理:

硼与甲亚胺在弱酸条件下形成棕黄色配合物,在420nm有特征吸收峰。

 

自备实验用品及仪器:

天平、常温离心机、震荡仪、可见分光光度计/酶标仪微量石英比色皿/96孔板

 

试剂组成和配制:

试剂一:液体5mL×1支,4℃保存。

试剂二:粉剂×1瓶,4℃保存。临用前加8mL蒸馏水溶解,加0.125mL乙酸。

试剂三:粉剂×1瓶,4℃避光保存。临用前加4mL蒸馏水溶解。

 

样本处理:

新鲜土样风干,过100目筛,按照土壤质量(g):蒸馏水体积(mL)为12的比例(建议称取约0.5g土样,加入1mL蒸馏水)加入蒸馏水,沸水中浸提10min,待自然冷却,加入50μL试剂一,震荡5min8000g 25℃离心10min,取上清液待测。

 

测定操作表:

 


空白管

测定管

样本(μL


40

试剂二(μL

80

80

试剂三(μL

40

40

H2OμL

80

40

充分混匀,25℃黑暗中静置1h

微量石英比色皿/96孔板,蒸馏水调零,测定420nm处吸光值A,分别记为A空白管和A测定管,△A=A测定管-A空白管

 

计算公式:

a.        用微量石英比色皿测定的计算公式如下

标准曲线:y = 0.3897x - 0.021R² = 0.9995

全硼含量(mg/kg=(△A+0.021÷ 0.3897÷W÷V样总)

                 = 2.56×(△A+0.021÷W

 

V样总:加入提取液体积,1mLW:样本质量,g

 

b.       96孔板测定的计算公式如下

标准曲线:y = 0.1949x - 0.021R² = 0.9995

有效硼含量(mg/kg=(△A+0.021÷ 0.1949÷W÷V样总)

                 =5.13×(△A+0.021÷W

V样总:加入提取液体积,1mLW:样本质量,g

 

注意事项:

1.       配制好的试剂二4℃保存不可超过7天。

2.       显色时严格控制温度并且避光,以免显色剂见光分解。


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