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免疫球蛋白E(IgE)酶联免疫试剂盒

简要描述:免疫球蛋白E(IgE)酶联免疫试剂盒用于测定人、大鼠、豚鼠、猪、鸡、鸭、马、兔子血清、血浆及相关液体样本中免疫球蛋白 E(IgE)含量。

  • 更新时间:2024-06-27
  • 厂商性质:生产厂家
  • 生产地址:上海
  • 访  问  量:574

详细介绍

品牌YLKBIOCAS详见说明书
分子式详见说明书纯度详见说明书
分子量详见说明书货号YLK-1012E
规格96T/48T供货周期现货
主要用途科研应用领域化工,生物产业

免疫球蛋白E(IgE)酶联免疫试剂盒


本试剂盒仅供研究使用。

使用目的:

本试剂盒用于测定人、大鼠、豚鼠、猪、鸡、鸭、马、兔子血清、血浆及相关液体样本中免疫球蛋白 E(IgE)含量。



实验原理

本试剂盒应用双抗原夹心法测定标本中免疫球蛋白 E(IgE)水平。用纯化的抗原包被微孔板,制成固相抗原,往包被的微孔中依次加入免疫球蛋白 E(IgE),再与 HRP 标记的抗原结合,形成抗原-抗体-酶标抗原复合物,经过*洗涤后加底物 TMB 显色。TMB HRP 酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的免疫球蛋白E(IgE)呈正相关。用酶标仪在 450nm 波长下测定吸光度OD ,通过标准曲线计算样品中免疫球蛋白 E(IgE)浓度。

试剂盒组成

1

30 倍浓缩洗涤液

20ml×1

7

终止液

6ml×1

2

酶标试剂

6ml×1

8

标准品(320ng/ml

0.5ml×1

3

酶标包被板

12 ×8

9

标准品稀释液

1.5ml×1

4

样品稀释液

6ml×1

10

说明书

1

5

显色剂 A

6ml×1

11

封板膜

2

6

显色剂 B

6ml×1/

12

密封袋

1


标本要求

1. 标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融

2. 不能检测含 NaN3 的样品,因 NaN3 抑制辣根过氧化物酶的HRP活性。



操作步骤

1. 标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。

160ng/ml

5 号标准品

150μl 的原倍标准品加入 150μl 标准品稀释液

80ng/ml

4 号标准品

150μl 5 号标准品加入 150μl 标准品稀释液

40ng/ml

3 号标准品

150μl 4 号标准品加入 150μl 标准品稀释液

20ng/ml

2 号标准品

150μl 3 号标准品加入 150μl 标准品稀释液

10ng/ml

1 号标准品

150μl 2 号标准品加入 150μl 标准品稀释液

2. 加样:分别设空白孔空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样 50μl,待测样品孔中先加样品稀释液 40μl


然后再加待测样品 10μl样品最终稀释度为 5 。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。

3. 温育:用封板膜封板后置 37℃温育 30 分钟。

4. 配液:将 30 倍浓缩洗涤液用蒸馏水 30 倍稀释后备用

5. 洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置 30 秒后弃去,如此重复 5 次,拍干。

6. 加酶:每孔加入酶标试剂 50μl,空白孔除外。

7. 温育:操作同 3

8. 洗涤:操作同 5

9. 显色:每孔先加入显色剂 A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色10 分钟.

10. 终止:每孔加终止液 50μl,终止反应此时蓝色立转黄色

11. 测定:以空白空调零,450nm 波长依序测量各孔的吸光度OD 测定应在加终止液后 15 分钟以内进行。

操作程序总结:

637861489646704625219.png


计算

以标准物的浓度为横坐标,OD 值为纵坐标,在坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的

OD 值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与 OD 值计算出标准曲线的直线回归方程式,将样品的 OD 值代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,即为样品的实际浓度。


注意事项

1. 试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡 15-30 分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。

2. 浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。

3. 各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间最好控制在 5 分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。

4. 请每次测定的同时做标准曲线,最好做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD 值大于标准品孔第一孔的 OD 值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n 倍)后再测定,计算时请最后乘以总稀释倍数(×n×5)。

5. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。

6. 底物请避光保存。

7. 严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.

8. 所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。

9. 本试剂不同批号组分不得混用。


免疫球蛋白E(IgE)酶联免疫试剂盒保存条件及有效期

1. 试剂盒保存:;2-8℃。

2. 有效期:6 个月


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