RPMI 8226人多发性骨髓瘤细胞

RPMI 8226人多发性骨髓瘤细胞

简称：RPMI 8226

中文名：人多发性骨髓瘤细胞

别名：RPMI 8226; RPMI.8226; RPMI8226; RPMI no 8226; 8226; RPMI 8226/S; RPMI-8226S; RPMI8226/S; 8226/S; Roswell Park Memorial Institute 8226; GM02132; GM2132; GM 2132; Simpson

种属：人

来源：浆细胞骨髓瘤；男性

培养条件：1640+10%FBS+1%双抗

培养环境：air, 95%; carbon dioxide (CO2), 5%

状态：悬浮

NOTE: FOR RESEARCH USE ONLY.

细胞培养操作步骤：

1. 吸走多余培养基，加入3-5mL PBS后轻轻晃动培养瓶润洗细胞；

2. 吸干净PBS后

加入1mL 0.25%胰-酶-0.53mM EDTA，轻轻摇晃培养皿使胰-酶浸没细胞表面，培养瓶放37度培养箱消化；

（细胞对于消化比较敏感，消化过度会严重影响细胞状态，导致细胞传代死亡漂浮或者传代后不长。细胞消化到细胞间隙变大但未脱落，可以轻轻吹下时即可终止，禁止消化到细胞*漂浮。混匀细胞时尽量轻柔，不要吹出大量气泡。）

3. 加入6-8ml*培养基终止消化，轻轻吹下细胞混匀；

4. 将混匀的细胞1000rpm（约150g）离心3min，弃上清，再用新鲜培养基重悬37度培养箱继续培养；

传代比例: 不同细胞生长速度不一，具体传代比例视细胞生长速度而定，大部分细胞适用1:3-1:4传代，生长较慢的细胞可以1:2传代。

注意事项：不同品牌胰酶消化时间差别较大，注意严格控制消化时间
消化传代细胞时吹打细胞注意尽量轻柔，不要产生过多气泡以免影响细胞状态。

Cell cryopreservation

1.冻存液：92%*培养基+8%DMSO（可以根据实验室条件自行选择）

2.降温步骤：4度10min，-20度2h，-80过夜后液氮保存。

冻存方法：

1.消化并离心获得细胞沉淀后，加配置好的冻存液轻轻重悬细胞；
2.将细胞悬液尽快移入已经做好标记的冻存管；
3.将冻存管转入程序冻存盒，放入-80度冰箱过夜，第二天转入液氮保存；没有程序冻存盒的实验室，加入细胞后可以将冻存管放在泡沫盒中4度静置5-10min，再-20度静置2h后转入-80度过夜，第二天转入液氮保存。

Tips：
1.细胞半贴壁圆形生长，部分悬浮圆形，传代时均可收集培养，换液时将悬浮细胞离心收集后重新接回原瓶，若贴壁细胞较多活性较好时可以不要悬浮的细胞；
2.传代有部分细胞碎片可以换液后用PBS润洗细胞清除，使用的PBS需要恢复到室温，加入时不要冲到细胞面，润洗尽量轻柔；
3.该细胞生长偏慢，比较容易死亡，不建议没有相关细胞操作经验的客户单独培养该细胞。

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