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肌酸激酶(CK)测定试剂盒

简要描述:肌酸激酶(CK)测定试剂盒测定意义:
CK(EC 2.7.3.2)主要存在于心脏、肌肉以及脑等组织中,能可逆地催化肌酸与ATP之间的转磷酰基反应,在能量运转、肌肉收缩和ATP再生中有重要作用,是临床诊断心脑疾病的一个重要指标。

  • 更新时间:2024-06-29
  • 厂商性质:生产厂家
  • 生产地址:上海
  • 访  问  量:538

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详细介绍

品牌YLKBIOCAS详见说明书
分子式详见说明书纯度详见说明书
分子量详见说明书货号YLK-SH126
规格100管/96样、50管/48样供货周期现货
主要用途科研应用领域化工,生物产业
测定方法:微量法、紫外分光光度法

肌酸激酶(CK)测定试剂盒说明书

                                                 微量法100T/96S

 

    意:正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。

测定意义:

CK(EC 2.7.3.2)主要存在于心脏、肌肉以及脑等组织中,能可逆地催化肌酸与ATP之间的转磷酰基反应,在能量运转、肌肉收缩和ATP再生中有重要作用,是临床诊断心脑疾病的一个重要指标。

 

测定原理:

CK催化磷酸肌酸和ADP生成肌酸和ATP,己糖激酶催化ATP与葡萄糖形成6-磷酸葡萄糖,6-磷酸葡萄糖脱氢酶催化6-磷酸葡萄糖与NADP+生成NADPH,导致340nm光吸收值增加。

 

自备实验用品及仪器:

天平、低温离心机、恒温水浴锅、酶标仪、96孔板和蒸馏水。

 

试剂组成和配制:

提取液:液体100mL×1瓶,4℃保存。

试剂一:粉剂1瓶,4℃避光保存,使用前加10mL蒸馏水溶解。

试剂二:液体10mL×1瓶,4℃保存。

工作液:临用前根据用量将试剂一和试剂二以1:1混合。使用前37℃温育2min

 

粗酶液提取:

1.        组织样本:按照组织质量(g):提取液体积(mL)15~10的比例(建议称取约0.1g组织,加入1mL提取液)进行冰浴匀浆,然后10000g4℃,离心15min

2.        血清样本:直接测定。

 

测定操作表:

1. 酶标仪预热30min,调节波长至340nm

2.在96孔板中加入40μL样本和60μL蒸馏水,最后加入100μL工作液,立即混匀,37℃下测定初始吸光值A11min后的吸光值A2ΔAA2-A1

 

CK活性计算公式:

1)按组织蛋白含量计算

酶活定义:37℃pH7.0时,每毫克蛋白质1min内催化产生1nmol NADPH为一个酶活单位。

CK活性(nmol/min/ mg prot=×V反总÷V×Cpr÷T= 1608×△A÷Cpr

2)按组织样本质量计算:

酶活定义:37℃pH7.0时,每克样品1min内催化产生1nmol NADPH为一个酶活单位。

CK活性(nmol/min/g 鲜重)= ×V反总÷V÷V样总×W÷T= 1608×△A÷W

 

3)按血清计算:

酶活定义:37℃pH7.0时,每升血清1min内催化产生1nmol NADPH为一个酶活单位。

CK活性(nmol/min/mL=×V反总÷V÷T= 1608×△A

NADPH摩尔消光系数,6220 L /mol/cmd96孔板光径,0.5cmV反总:反应体系总体积,0.2mLV样:反应体系中样本体积,0.04mLT,反应时间,1minCpr:样本蛋白浓度,mg/mLW:样本质量,g

 

注意事项:

1. 配制好的工作液4℃稳定7天,请配制后尽快使用。

2. 血清的CK不稳定,采集样本后尽快测定,4℃避光保存可稳定24h

3. 样品蛋白质含量需要另外测定,可选用BCA蛋白含量测定试剂盒进行测定。

4. OD值大于0.5可用提取液适当稀释样品,并在计算公式中相应的改变稀释倍数。


肌酸激酶(CK)测定试剂盒仅供科研!

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